多肽药物的固相合成通常由数十步氨基酸缩合反应组成。为增大产率，每一步须保证反应完全进行。为缩短整体生产周期提高生产效率，及时监测每步的反应终点格外重要。传统的茚三酮显色反应检测耗时费力，对多肽生产而言效率过低。

在线监测可原位、实时的监测多肽合成过程中的氨基酸原料含量变化趋势，及时判断反应终点，显著提升整体生产效率。

下图通过反应在线监测快速判断了Fmoc-Asn-OH 缩合反应终点。对树脂与原料Fmoc-Asn-OH的缩合反应进行了原位在线监测，红框内特征峰强反映了原料含量。0至40 min时原料含量不断下降，直至为初始值的67%，此后40至120 min原料含量不再变化，提示40分钟为反应终点。

而在使用在线监测前，研究人员仅能使用低效的茚三酮显色反应确定终点或者将反应延长至2h以保证反应完全，整体研发和生产周期过长。

多肽固相合成的在线监测具备普适性。下图显示多个Fmoc-氨基酸均在固定光谱位置有特征峰，且与溶剂（DMF）和辅助试剂（HOBt）的特征峰无干扰，均可依据峰面积进行缩合反应在线定量监测。

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【鉴知技术简介】

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